Методы изучения цитокинов реферат

    Изучение особенностей и характера распределения аллельных вариантов генов цитокинов IL4, IL5, TNFA среди больных атопическим дерматитом и среди здоровых лиц. Расскажите о выработке цитокинов в системе врожденного иммунитета. Для контроля используют лунки с интактными необработанными клетками, зараженными вирусом. Таким образом, клетки-продуценты, цитокины и специфические для них рецепторы на клетках мишенях формируют единую медиаторную сеть. Lindsay M.

    Анализ особенностей продукции провоспалительных цитокинов при ряде гнойно-воспалительных процессов методом иммуногистохимии. Описание их связи с функциональной активностью нейтрофилов и особенностями субпопуляционного состава лимфоцитов в крови. Изучение особенностей и характера распределения аллельных вариантов генов цитокинов IL4, IL5, TNFA среди больных атопическим дерматитом и среди здоровых лиц.

    Исследование характера распределения HLA-антигенов среди больных атопическим дерматитом. Использование метода выявления микроядер в клетках в клинической практике для диагностики воспалительных заболеваний и прогнозирования реферат течения.

    Участие многоядерных фагоцитов в продуцировании провоспалительных цитокинов методы изучения цитолитических энзимов.

    Работы в архивах красиво оформлены согласно требованиям ВУЗов и содержат рисунки, диаграммы, методы изучения цитокинов реферат и т.

    Рекомендуем скачать работу и оценить ее, кликнув по соответствующей звездочке. Главная База знаний "Allbest" Медицина Методы изучения цитокинов - цитокинов работы. В табл. Однако эти методы тестирования отличаются недостаточной чувствительностью и информативностью. Молекулы ингибиторов и антагонистов могут маскировать биологическую активность цитокинов.

    Некоторые цитокины проявляют общую биологическую активность. Тем реферат тему проблемы аэс менее эти методы идеальны для тестирования специфической активности рекомбинантных цитокинов. Таблица 7. Клеточные линии, используемые для тестирования биологической активности цитокинов. Окончание табл. Лабораторная работа Определение биологической активности ИЛ-1 по комитогенному действию на пролиферацию тимоцитов мышей.

    В основе метода биологического тестирования ИЛ-1 лежит способность цитокина стимулировать пролиферацию мышиных тимоцитов. ИЛ-1 может быть определен в культуре моноцитов, стимулированных ЛПС, а также в любой биологической жидкости организма. Необходимо обратить внимание на ряд деталей. Тимоциты отвечают на ИЛ-2 и митогены, методы изучения цитокинов реферат в препаратах, тестируемых на ИЛ-1, следует определять также присутствие ИЛ-2 и митогенов.

    I. Оценка клеток-продуцентов.

    Готовят ряд последовательных двукратных разведений опытных биологические жидкости организма и контрольных образцов. В качестве контрольных используют биологические жидкости, содержащие ИЛ-1 или образцы, полученные при инкубации мононуклеарных клеток без ЛПС, и лабораторный стандартный ИЛсодержащий препарат.

    В луночные круглодонные планшеты из каждого разведения переносят по 50 мкл в 6 лунок.

    Цитокины (citokines).

    Для определения уровня радиоактивности клетки культуры переносят на фильтровальную бумагу с помощью автоматического сборщика клеток, фильтры высушивают и определяют включение метки жидкостным сцинтилляционным счетчиком. Если тимоциты отвечают на стимуляцию стандартным ИЛ-1, то индекс стимуляции исследуемого образца, превышающий 3, достоверно свидетельствует об ИЛактивности.

    Биоанализ является единственным методом для оценки функционирования цитокина, но данный метод должен быть дополнен разными видами соответствующего контроля на специфичность с использованием моноклональных антител. Добавление определенных моноклональных антител к цитокину в культуру блокирует биологическую активность цитокина, что доказывает: сигналом к пролиферации методы изучения цитокинов реферат линии служит определяемый цитокин.

    Использование биоанализа для выявления интерферона. Принцип оценки биологической активности ИФН основан на его противовирусном действии, которое определяется по степени ингибиции размножения тест-вируса в культуре клеток. В работе могут быть использованы клетки, чувствительные к действию ИФН: первично трипсинизированные клетки-фибробласты эмбрионов кур и человека, перевиваемые клетки диплоидных фибробластов человека и культура мышиных клеток L При методы изучения цитокинов реферат противовирусного действия ИФН целесообразно использовать вирусы с коротким циклом размножения, высокой чувствительностью к действию ИФН: вирус энцефаломиелита мышей, везикулярного стоматита мыши и др.

    После формирования полного монослоя из лунок удаляют ростовую среду и в каждую лунку добавляют по мкл поддерживающей среды. Титрование активности ИФН в исследуемых образцах проводят методом двукратных разведений на монослое фибробластов. Для контроля используют лунки с интактными необработанными клетками, зараженными вирусом. В каждом исследовании в качестве референс-препаратов используют пробы референс-ИФН с известной активностью.

    Методы изучения цитокинов

    Антисыворотка отменяет действие соответствующего цитокина, что позволяет идентифицировать тип ИФН. Определение биологической активности миграции ингибирующего фактора. В настоящее время сформировались совершенно новые представления о природе и свойствах МИФ, открытого в х годах прошлого столетия в качестве медиатора клеточного иммунитета и много лет остававшегося без должного внимания Bloom B. Лишь в последние лет стало ясно: МИФ представляет собой один из важнейших биологических медиаторов в организме с широким спектром биологических функций цитокина, гормона, фермента.

    Действие МИФ на клетки-мишени реализуется через СD74 - -рецептор или через неклассический путь эндоцитоза. МИФ рассматривают как важный медиатор воспаления, активирующий функцию макрофагов выработку цитокинов, фагоцитоз, цитотоксичность и др.

    Накапливается все методы изучения цитокинов реферат сведений о роли МИФ в патогенезе многих воспалительных заболеваний, включая сепсис, ревматоидный артрит РАгломерулонефрит и др.

    Методы изучения цитокинов реферат 7987

    При РА значительно увеличена концентрация МИФ в жидкости пораженных суставов, коррелирующая с тяжестью заболевания. Под влиянием МИФ возрастает выработка провоспалительных цитокинов как макрофагами, так и синовиальными клетками.

    Известны различные методы тестирования активности МИФ, когда мигрирующие клетки клетки-мишени для МИФ помещают в стеклянный капилляр капиллярный теств каплю агарозы или в агарозный колодец. Мы приводим сравнительно простой скрининговый метод, основанный на формировании на дне лунок луночного плоскодонного планшета клеточных микрокультур лейкоцитов или макрофаговметоды изучения цитокинов реферат по площади и числу клеток, с последующим их культивированием в питательной среде и определением изменения площади этих микрокультур при действии МИФ Суслов А.

    Определение биологической активности МИФ проводят с помощью устройства для формирования клеточных микрокультур рис. Гамалеи РАМН.

    Здоровый образ жизни доклад физкультураКурсовая работа международный лизинг
    Цитаты для эссе по обществознанию человекОрганы государственной власти рф курсовая работа
    Алгоритм написание курсовой работыЧем отличается реферат от

    В лунки луночного планшета Flow, Великобритания или аналогичные добавляют по мкл разведенной на культуральной среде пробы, в которой определяют МИФ-активность каждое разведение в 4 параллелях, опытные пробы. Затем животное забивают декапитацией, осторожно прокалывают брюшную стенку в области паха и через иглу шприцем отсасывают экссудат.

    Клетки перитонеального экссудата дважды отмывают раствором Хенкса, центрифугируя их мин при g.

    [TRANSLIT]

    Подсчет проводят реферат камере Горяева. Вставляют ножки штатива в угловые лунки планшета. Клеточную суспензию набирают автоматической пипеткой в наконечники - по 5 мкл в каждый, ополаскивают от избытка клеток однократным опусканием в среду и вставляют вертикально в гнезда штатива системы.

    Заполненный штатив с наконечниками выдерживают при комнатной температуре в течение 1 ч на строго горизонтальной поверхности. Они содержат 4 а-спиральных домена 2 пары цитокинов, расположенных под углом друг к другу. Выделяют короткий и длинный по протяженности а-спиралей варианты.

    Молекулы с преобладанием р-складчатых структур. Методы изучения мозаичные структуры, например, IL Краткое описание Цитокины — самая многочисленная, наиболее важная и универсальная в функциональном отношении группа гуморальных факторов системы иммунитета, в равной степени важная для реализации врожденного и адаптивного иммунитета. Содержание 1. Общая характеристика цитокинов цитокинов реферат. Рецепторы для цитокинов 3. Внутриклеточная передача сигнала при действии цитокинов 4.

    Особенности функционирования системы цитокинов 5. Противовоспалительные цитокины 6. Методы изучения цитокинов. Войти Поиск Новые работы Служба помощи. Рубрикатор Новые работы Служба помощи.

    Индуцированный различными стимуляторами, митогенами синтез цитокинов отражает методы изучения, резервную способность клеток отвечать на антигенный стимул в частности, на действие лекарственных препаратов. Сниженная индуцированная продукция цитокинов может служить одним из признаков иммунодефицитного состояния. Цитокины не специфичны в отношении конкретного антигена. Поэтому специфическая диагностика инфекционных, аутоиммунных и аллергических заболеваний с помощью определения уровня тех или иных цитокинов невозможна.

    В то же время оценка уровней цитокинов позволяет получить данные о тяжести воспалительного процесса, его переходе на системный уровень и прогнозе, функциональной активности клеток иммунной системы, о соотношении Th1- и Th2-клеток, что очень важно при дифференциальной диагностике ряда инфекционных и иммунопатологических процессов.

    В биологических средах можно определить цитокины количественно с помощью целого ряда методов иммуноанализа, используя поликлональные и моноклональные антитела. ИФА позволяет узнать, каковы точные концентрации цитокинов в биологических жидкостях организма.

    Методы изучения цитокинов реферат 9764

    Иммуноферментное выявление цитокинов имеет ряд преимуществ перед другими методами высокая чувствительность, специфичность, независимость от присутствия антагонистов, возможность точного автоматизированного учета, стандартизации учета. Однако и этот метод имеет свои ограничения: ИФА не характеризует биологическую активность цитокинов, может давать ложные результаты за счет перекрестно-реагирующих эпитопов. Биологическое тестирование проводят на основе знания основных свойств цитокинов, их действия на клетки-мишени.

    Изучение биологических эффектов цитокинов позволило разработать четыре методы изучения цитокинов реферат тестирования цитокинов:. ИЛ-1 определяют по стимулирующему действию на пролиферацию мышиных тимоцитов, активированных митогеном in vitro; ИЛ-2 - по способности стимулировать пролиферативную активность лимфобластов; по цитотоксическому действию на мышиные фибробласты L тестируют ФНОа и лимфотоксины.

    Колониестимулирующие факторы оценивают по их способности поддерживать рост костномозговых предшественников в виде колоний в агаре. Противовирусную активность ИФН выявляют по угнетению цитопатического методы изучения цитокинов реферат вирусов в культуре диплоидных фибробластов человека и опухолевой линии фибробластов мышей L Созданы клеточные линии, рост которых зависит от присутствия определенных цитокинов.

    В таблице представлен список клеточных линий, используемых для тестирования цитокинов. Однако эти методы тестирования отличаются недостаточной чувствительностью и информативностью. Молекулы ингибиторов и антагонистов могут маскировать биологическую активность цитокинов. Некоторые цитокины проявляют общую биологическую активность. Тем не менее эти методы идеальны для тестирования специфической активности рекомбинантных цитокинов.

    Определение биологической активности ИЛ-1 по комитогенному действию на пролиферацию тимоцитов мышей. В основе метода биологического тестирования ИЛ-1 лежит способность цитокина стимулировать пролиферацию мышиных тимоцитов. Методы изучения цитокинов реферат может быть определен в культуре моноцитов, стимулированных ЛПС, а также в любой биологической жидкости организма.

    Необходимо обратить внимание на ряд деталей. Тимоциты отвечают на ИЛ-2 и митогены, поэтому в препаратах, тестируемых на ИЛ-1, следует определять также присутствие ИЛ-2 и митогенов. Готовят ряд последовательных двукратных разведений опытных биологические жидкости организма и контрольных образцов.

    В качестве контрольных используют биологические жидкости, содержащие ИЛ-1 или образцы, полученные при инкубации мононуклеарных клеток без ЛПС, и лабораторный стандартный ИЛсодержащий препарат.

    390483

    В луночные круглодонные планшеты из каждого разведения переносят по 50 мкл в 6 лунок. Для определения уровня радиоактивности клетки культуры переносят на фильтровальную бумагу с помощью автоматического сборщика клеток, фильтры высушивают и определяют включение метки жидкостным сцинтилляционным счетчиком. Если тимоциты отвечают на стимуляцию стандартным ИЛ-1, то индекс стимуляции исследуемого образца, превышающий 3, достоверно свидетельствует об ИЛактивности. Биоанализ является единственным методом для оценки функционирования цитокина, но данный метод должен быть дополнен разными видами соответствующего контроля на специфичность с использованием моноклональных антител.

    Добавление определенных моноклональных антител к цитокину в культуру блокирует биологическую активность цитокина, что доказывает: сигналом к пролиферации клеточной линии служит методы изучения цитокинов реферат цитокин.

    Использование биоанализа методы изучения цитокинов реферат выявления интерферона. Принцип оценки биологической активности ИФН основан на его противовирусном действии, которое определяется методы изучения цитокинов реферат степени ингибиции размножения тест-вируса в культуре клеток. В работе могут быть использованы клетки, чувствительные к действию ИФН: первично трипсинизированные клетки-фибробласты эмбрионов кур и человека, перевиваемые клетки диплоидных фибробластов человека и культура мышиных клеток L При оценке противовирусного действия ИФН целесообразно использовать вирусы с коротким циклом размножения, высокой чувствительностью к действию ИФН: вирус энцефаломиелита мышей, везикулярного стоматита мыши и др.

    После формирования полного монослоя из лунок удаляют ростовую среду и в каждую лунку добавляют по мкл поддерживающей среды. Титрование активности ИФН в исследуемых образцах проводят методом двукратных разведений на монослое фибробластов. В каждом исследовании в качестве референс-препаратов используют пробы референс-ИФН с известной активностью. Антисыворотка отменяет действие соответствующего цитокина, что позволяет идентифицировать тип ИФН.

    Определение биологической активности миграции ингибирующего фактора МИФ.

    Дублирование функций обеспечивает надежность работы системы цитокинов. Однако и этот метод имеет свои ограничения: ИФА не характеризует биологическую активность цитокинов, может давать ложные результаты за счет перекрестно-реагирующих эпитопов.

    В настоящее время сформировались совершенно новые представления о природе и свойствах МИФ, открытого в х годах прошлого столетия в качестве медиатора клеточного иммунитета и много лет остававшегося без должного внимания. Лишь в последние лет стало ясно: МИФ представляет собой один из важнейших биологических медиаторов в организме с широким спектром биологических функций цитокина, гормона, фермента.

    Действие МИФ на клетки-мишени реализуется через СDрецептор или через неклассический путь эндоцитоза.

    Однако даже в клетках одного типа различия в кинетике экспрессии генов и синтеза различных цитокинов могут быть существенными. Порядок работы 1. С тех пор все новые цитокины кроме хемокинов -- см. Группа рецепторов, внеклеточные домены которых относят к суперсемейству иммуноглобулинов, включает две группы — рецепторы для IL-1 и несколько рецепторов, цитоплазматическая часть которых обладает тирозинкиназной активностью. Перечислите общие свойства цитокинов.

    МИФ рассматривают как важный медиатор воспаления, активирующий функцию макрофагов выработку цитокинов, фагоцитоз, цитотоксичность и др. Накапливается все больше сведений о роли МИФ в патогенезе многих воспалительных заболеваний, включая сепсис, ревматоидный артрит РАгломерулонефрит и др. При РА значительно увеличена концентрация МИФ в жидкости пораженных суставов, коррелирующая с тяжестью заболевания. Под влиянием МИФ возрастает выработка провоспалительных цитокинов как макрофагами, так и синовиальными клетками.

    Спектр биологической активности цитокинов, их вмешательство в работу систем организма. Особенности лечения препаратами цитокинов. Функциональная классификация интерлейкинов. Лечебная и профилактическая активность интерферонов, их широкое применение. Классификация цитокинов по типу пространственной структуры, клеточных рецепторов, их биологическим свойствам.

    Механизм методы изучения цитокинов реферат цитокинов на клетку, их основная биологическая функция. Роль цитокинов в развитии заболеваний воспалительного генеза. Характеристика цитокинов как большой группы медиаторов белковой природы, рассмотрение основных групп: интерлейкины, интерфероны, колониестимулирующие факторы, хемокины. Механизмы действия цитокинов, знакомство с интерферонами, функция хемокинов.

    Рассмотрение классификации цитокинов - продуцируемых клетками белково-пептидных факторов, осуществляющих короткодистантную регуляцию межклеточных и межсистемных взаимодействий. Общие свойства и роль цитокинов в развитии заболеваний воспалительного генеза.

    Цитокины - группа полипептидных медиаторов межклеточного взаимодействия, участвующих в формировании и регуляции защитных реакций организма, а также регенерации тканей; их свойства и функции.

    Рассмотрение классификации по биологическим свойствам. История наблюдения эффектов кахектина, открытия Т-клеточного ростового фактора, первого клинического применения рекомбинантных интерферонов. Классификация, свойства, механизм действия и роль в патологии цитокинов - пептидных информационных молекул.

    Общие представления о цитокинах: описание, физические и химические свойства, назначение. Определение концентраций цитокинов в методы изучения цитокинов реферат жидкостях, изучение их синтеза на уровне отдельных клеток. Изучение экспрессии генов и анализ полиморфизма. Цитокины и их клеточные рецепторы. Фагоцитоз как важный компонент антимикробной защиты. Выбор эффекторных механизмов клеточного иммунитета.

    Иммунология. Цитокины 1.

    Методы изучения цитокинов реферат взаимодействия цитокинов. Реакции, направленные на устранение инфицированных вирусами клеток организма.

    Механизмы иммунных взаимодействий. Взаимосвязь факторов и механизмов неспецифической защиты организма и специфического иммунного ответа. Классификация и общие свойства цитокинов. Вилочковая железа. Гипоталамо-гипофизарно-надпочечниковая система.

    Описание условий труда угольных шахт. Цитокины и их влияние на развитие легочной профпатологии. Ассоциация полиморфизмов генов цитокинов с легочной профессиональной заболеваемостью. Общая характеристика легочных профзаболеваний работников угольных шахт.

    Работы в архивах красиво оформлены согласно требованиям ВУЗов и содержат рисунки, диаграммы, формулы и т.